БЗ 4-98
ГОСТ 30061-93
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
ЗЕРНО И СОЛОМА ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР,
ЛУК РЕПЧАТЫЙ, ПОЧВА
МЕТОД ИЗМЕРЕНИЯ УРОВНЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ГЕРБИЦИДА СТАРАНЕ
Издание официальное
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ Минск
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН Российской Федерацией
ВНЕСЕН Техническим секретариатом Межгосударственного Совета по стандартизации, метрологии и сертификации
2 ПРИНЯТ Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г.
За принятие проголосовали:
|
Наименование Государства |
Наименование национальною органа по стандартизации |
|
Республика Беларусь |
Госстандарт Беларуси |
|
Республика Казахстан |
Казглавстандарт |
|
Российская Федерация |
Госстандарт России |
3 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
4 Переиздание. Ноябрь 1998 г.
© Издательство стандартов, 1994 © ЙПК Издательство стандартов, 1999
Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения Госстандарта России
П
содержание
3 Область применения 1
2 Нормативные ссылки 2
3 Аппаратура, материалы, реактивы………3
4 Отбор проб 4
5 Подготовка к измерению 4
6 Проведение измерения &
7 Техника безопасности работ 9
Приложение А Отбор проб для определения гербицида старане . . 0
Приложение Б Техника безопасности работ…….9
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
ЗЕРНО И СОЛОМА ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР, ЛУК РЕПЧАТЫЙ, ПОЧВА
Метод , измерения уровня остаточных количеств гербицида старане
Grain and straw of cereales, onion, soil.
Method for determination of the residue level of herbicide Starane
Дата введения 1995—01—Oi
1 ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Настоящий стандарт распространяется на зерно и солому зерновых культур, репчатый лук, почву и устанавливает метод измерения уровня остаточных количеств гербицида старане посредством газожидкостной хроматографии.
Гербицид «старане (флуроксипир) — новый селективный после-всходовый препарат, эффективный в борьбе с двудольными сорняками, устойчивыми к 2,4-Д и 2М-4Х, (подмаренник цепкий, виды горца, звездчатка средняя, одуванчик и др.) и многолетними кор-неогпрысковыми сорняками (вьюнок полевой) на посевах зерновых культур. Проходит испытания на плантациях лука.
Метод основан на извлечении старане щелочным раствором этанола или ацетона; гидролизе 1-м)етилгептилового эфира флу-роксипира; очистке экстракта и определении получаемой флурокси-пир-кислоты после бутилирования на газовом хроматографе, снабженном детектором постоянной скорости рекомбинации ионов (ДПР) или по захвату электронов (ДЭЗ) с использованием полу-полярной силиконовой неподвижной фазы и газа-носителя — азота. Нижний предел чувствительности метода составляет 0,01— —0,05 мг/кг.
Издание официальное
2 НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты и технические условия:
ГОСТ 83—79 Натрий углекислый. Технические условия ГОСТ 1770—74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия ГОСТ 2603—79 Ацетон. Технические условия ГОСТ 4166—76 Натрий сернокислый. Технические условия ГОСТ 4204—77 Кислота серная. Технические условия ГОСТ 4328—77 Натрий гидроксид. Технические условия ГОСТ 5962—67 Спирт этиловый ректификованный. Технические условия
ГОСТ 6006—78 Бутанол-1. Технические условия ГОСТ 6709—72 Вода дистиллированная. Технические условия ГОСТ 7328—82 Меры массы общего назначения и образцовые. Технические условия
ГОСТ 9293—-74 Азот газообразный и жидкий. Технические условия
ГОСТ 12026—76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ 14262—78 Кислота серная особой чистоты. Технические условия
ГОСТ 20015—88 Хлороформ. Технические условия ГОСТ 23932—90 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия
ГОСТ 24104—88 Весы лабораторные общего назначения и об разцовые. Общие технические условия
ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 29169—91 Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой
3 АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ, РЕАКТИВЫ
Хроматограф газовый («Цвет 550», «Цвет 600»), оборудованный детектором постоянной скорости рекомбинации ионов или детектором по захвату электронов (предпочтителен детектор с 63Ni) с пределом детектирования по линдану не выше 4ХЮ~14 г/см3 и следующими характеристиками:
показания электрометра 4ХЮ10 или 8хЮ10 (4Х10-12 А или 8ХЮ-12 А);
скорость движения ленты самописца 240 мм/ч;
колонка стеклянная спиральная — длина 2 м, внутренний диаметр 3 ММ;
носитель-Инертон-Супер с размером частиц 0,12—0,16 мм и
неподвижной фазой 5 % ХЕ-60;
температура колонки 240 °С, детектора — 300 °С, испарителя —
260 °С;
скорость газа-носителя 30 см3/мин;
объем вводимой пробы 5 мкдм3;
абсолютное время удерживания бутилового эфира флуроксипи-ра 6 мин;
линейность детектирования сохраняется в пределах 0,025— —0,5 нг;
альтернативная фаза — 5 % OV-225 на Инертоне-Супер, расход газа-носителя 30 см3/мин- абсолютное время удерживания 6 мин 18 с.
Прибор для перегонки растворителей стеклянный по ГОСТ 25336.
Мнкроширни, №11-10А. по нормативной документации.
Аппарат для встряхивания по нормативной документации.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М по нормативной документации или другой аналогичного типа.
Водоструйный насос по ГОСТ 25336.
Баня водяная по нормативной документации.
Весы аналитические лабораторные по нормативной документации.
Весы лабораторные общего назначения и образцовые по ГОСТ 24104.
Колбы конические плоскодонные вместимостью 100 и 250 см3 с пробками по ГОСТ 25336.
Воронки для фильтрования стеклянные по ГОСТ 25336.
Концентраторы грушевидные на шлифах со стеклянными пробками, КГУ-100, ТС.
Пипетки мерные на 0,1; 1,0; 5,0; 10,0; 25,0 см3 по ГОСТ 29169—91.
Стаканы стеклянные по ГОСТ 25336.
Цилиндры мерные стеклянные по ГОСТ 1770.
Колбы мерные по ГОСТ 1770.
Посуда и оборудование лабораторные стеклянные по ГОСТ 23932.
Пластинки для тонкослойной хроматографии по нормативной документации.
з
Фильтры бумажные по ГОСТ 12026 и «синяя лента» по нормативной документаций.
Флуроксипир (кислота).
Ацетон по ГОСТ 2603.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.
Н-Гекеан по нормативной документации, х. ч.
Кислота серная концентрированная по ГОСТ 4204, х. ч.
Кислота серная особой чистоты по ГОСТ 14262.
Натрий сернокислый безводный по 1ГОСТ 4166, х. ч.
Натрий гидроксид по ГОСТ 4328, х. ч.
Натрий двууглекислый по ГОСТ 83, х. ч.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Хлороформ медицинский по ГОСТ 20015.
Спирт Н-бутиловый по ГОСТ 6006, х. ч.
Азот особой чистоты по ГОСТ 9293.
Примечание — Допускается использовать аппаратуру и мерные средства измерения с такими же или лучшими метрологическими характеристиками.
4 ОТБОР ПРОВ
4.1 Отбор проб проводят по документации, указанной в приложении А.
5 ПОДГОТОВКА К ИЗМЕРЕНИЮ
5.1 Приготовление стандартных растворов с т а р а н е
5Л.1 Приготовление основного стандартного раствора №1 (1 м$/смг)*
Взвешивают навеску флуроксипира 0,05 г с погрешностью ±0,0001 г, помещают ее в мерную колбу вместимостью 50 см3, растворяют и доводят до метки этанолом. Хранят стандартный раствор № 1 в холодильнике при температуре 4°С в течение 1 мес.
5.1.2 Приготовление стандартного раствора № 2 (25 мкг/см3)
Раствор готовят последовательным разбавлением стандартного
раствора № 1.
5.1.3 Приготовление 10, 29 и 40 %-ных водных растворов гидроксида натрия
Взвешивают соответственно 100, 200 и 400 г с погрешностью ±0,01 г гидроксида натрия в термостойком стеклянном стакане вместимостью 1000 см3 и осторожно, при постоянном перемешивании, прибавляют около 600 см3 дистиллированной воды. Происходит сильное разогревание (!). После растворения щелочи стакан охлаждают, раствор переносят в мерную колбу вместимостью
1000 см3, ополаскивая стакан дистиллированной водой не менее двух раз, и доводят объем раствора до метки.
5 Л .4 Приготовление 2 и 4 %-ных спиртовых растворов гидроксида натрия
Берут по 100 см3 20 %-ного и 40 %-ного водного раствора гидроксида натрия, помещают в мерные колбы вместимостью 1000 см3 и доводят объем до метки этиловым спиртом при тщательном перемешивании.
5Л 5 Приготовление раствора серной кислоты концентрации с (H2SOA) — l моль/дм3
56 см3 концентрированной серной кислоты осторожно вливают в мерную колбу вместимостью 1000 см3, содержащую около 500 см3 дистиллированной воды. Происходит сильное нагревание (!). Раствор перемешивают, охлаждают до комнатной температуры и доводят до метки дистиллированной водой.
5Л.6 Приготовление растворов гидрокарбоната натрия концентрации с (NaHCOz)— 0,5 моль/дч3 и 0,25 моль/дм3
Взвешивают соответственно 42 или 21 г гидрокарбоната натрия с погрешностью =Ь0,01 г, помещают его в мерную колбу вместимостью 1000 см3, добавляют около 500 см3 дистиллированной воды, тщательно перемешивают до полного растворения осадка и доводят объем до метки дистиллированной водой.
5Л.7. Приготовление 2%-ного раствора серной кислоты в бутаноле для бутилирования
Осторожно приливают 2 см3 концентрированной серной кислоты к 88 см3 бутанола в мерную колбу вместимостью 100 см3, перемешивают и доводят объем до метки бутанолом.
Перед приготовлением раствора для удаления воды бутанол следует перегнать в стеклянном приборе для перегонки растворителя.
5Л.8 Подготовка хроматографической колонки
Готовую насадку (5 % ХЕ-60 на Инертоне-Супер) засыпают в стеклянную колонку и уплотняют вакуумом. Колонку закрывают стекловатой, устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют в токе азота при температуре 240 °С в течение 8—10 ч, не подключая к детектору.
6 ПРОВЕДЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЯ
6Л Приготовление рабочего стандартного раствора для составления градуировочного графика флуроксипира
Отбирают 1 см3 из стандартного раствора №2 (5Л.2), током
теплого воздуха или азота удаляют растворитель (этанол) и проводят бутилирование сухого остатка флуроксипира по 6.3.1.
6.2 Экстракция и очистка экстрактов зерна, соломы, лука, почвы
6.2.1 Зерно и солому подготавливают для проведения экстракции по 4.1.
Навеску муки массой (10+0,01) г или измельченной соломы массой (5+0,01) г помещают в коническую колбу вместимостью 100—250 см3, прибавляют туда 50 см3 2 %-ного раствора гидроксида натрия в этаноле, интенсивно встряхивают в течение 1 ч и оставляют на 16—18 ч, после чего колбу встряхивают 5 мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр, 10 см3 фильтрата переносят в делительную воронку и проводят очистку экстракта.
6.2.1.1 Для этого в делительную воронку добавляют 5 см3 раствора серной кислоты (по 5.1.5), 18 см3 дистиллированной воды и 10 см3 хлороформа. Воронку встряхивают 5 мин и после расслаивания растворителей нижний слой сливают в чистый стеклянный стакан, затем снова добавляют 10 см3 хлороформа и 5 мин встряхивают.
Хлороформенные фракции объединяют в стакане, водно-этано-ловый слой отбрасывают, воронку ополаскивают дистиллированной водой и хлороформовую фракцию возвращают в делительную воронку, обмывая стакан 2—3 см3 хлороформа.
Затем в делительную воронку приливают 10см3 0,25 М водного раствора гидрокарбоната натрия, приготовленного по 5.1,6, встряхивают ее 5 мин и после разделения слоев нижний хлороформовый слой отбрасывают.
В оставшейся в воронке водной фракции добавляют 5 см3 1 М
раствора серной кислоты, приготовленного по 5.1.5, и 5 см3, дистиллированной воды. Не закрывая воронку пробкой, осторожно встряхивают ее до полного прекращения выделения углекислого газа. Затем прибавляют 10 см3 хлороформа, встряхивают 5 мин и сливают нижний слой растворителя через слой безводного сернокислого натрия в грушевидный концентратор.
Экстракцию повторяют, приливая 10 см3 хлороформа. Хлороформовые фракции объединяют и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани 40 °С, после чего проводят бутилирование сухого остатка.
6.2.2 Из подготовленного по 4.1 для экстракции измельченного или растертого репчатого лука отбирают и взвешивают навеску массой (25+0,01) г и помещают ее в коническую колбу вместимостью 250 см3, прибавляют туда 50 см3 4 %-ного раствора гидроксида натрия в этаноле, приготовленного по 5.1.4, энергично встряхи
вают в течение 1 ч. Экстракт фильтруют методом декантации. Экстракцию повторяют еще с одной порцией (30 сма) растворителя. Затем экстракты объединяют и 20 см3 фильтрата переносят в делительную воронку.
6.2.2.1 Очистку экстракта проводят по 6.2.1.1.
6.1.3 Из почвы, подготовленной по 4.1 для экстракции, отбирают навеску, соответствующую 25 г воздушно-сухой почвы, помещают ее в коническую колбу вместимостью 250 см3 и приливают туда 50 см3 2 %-нопо раствора гидроксида натрия в этаноле, приготовленного по 5.1.4, для чернозема — 5 см3 10 %-ного раствора гидроксида натрия в воде и 45 см3, ацетона. Колбу интенсивно встряхивают в течение 1 ч и оставляют на 16—18 ч, после чего встряхивают в течение 10—15 мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр методом декантации п 10 см3 фильтрата переносят в делительную воронку.
6.2.3.1 Очистку экстракта проводят по 6.2.1.1, но используют 0,5 М раствор гидрокарбоната натрия, приготовленный по 5.1.6.
6.3. Бутилирование сухого остатка
6.3.1 Сухой остаток в концентраторе, полученный по 6.2.1, 6.2.2, 6.2.3, растворяют в 1 см3 2 %-ного раствора серной кислоты в бутаноле, приготовленного по 5.1.7. Концентратор плотно закрывают стеклянной пробкой на шлифе и помещают в водяную баню при температуре 10€°С на 30 мин, затем охлаждают и приливают туда 27 см3 дистиллированной воды и 10 см3, гексана, встряхивают в течение 5 мин и после разделения слоев хроматографируют.
6.3.1.1 Приготовление градуировочного графика рабочего стандартного раствора флуроксипира
Берут 5 см3 гексанового экстракта, после бутилирования сухого остатка флуроксипира, полученного по 6.1, переносят его в мерную колбу вместимостью 25 см3, доводят гексаном до метки, перемешивают и получают раствор с концентрацией флуроксипира 0,5 мкг/см3.
Затем последовательным разбавлением готовят растворы с концентрациями: ОД; 0,0’5; 0,04; 0,03; 0,02; 0,01 и 0,005 мкг/см3 для хроматографирования.
6.4 Хроматографирование
Хроматограф должен быть подготовлен к работе по 5.1.8 (колонка подключается к детектору) и выведен на рабочий режим согласно характеристикам по разделу 3.
6.4.1 Хроматографирование рабочего стандартного раствора флуроксипира и очищенного экстракта исследуемого объекта
В испаритель хроматографа микрошприцем вводят 5 мкдм3
каждого раствора флуроксипира, полученного по 6.3.1.1, или очищенного экстракта исследуемого объекта, полученного по 6.3.L
При хроматографировании наличие остаточного количества гербицида старане регистрируется самописцем прибора в виде пика со временем удерживания пика, полученного из рабочего стандартного раствора.
Градуировку хроматографа по стандартным растворам флурок-сипира проводят ежедневно перед началом измерения. Работу прибора контролируют в течение дня, вводя стандартный раствор через каждые 6 анализируемых проб.
Высоту пика каждого раствора флуроксипира измеряют и строят график зависимости высоты от концентрации (мкг/см3).
Из каждой пробы исследуемого объекта для хроматографирования микрошприцем отбирают 3 раза по 5 мкдм3 и вычисляют среднюю высоту пика. Высота ликов в пробе исследуемого объекта должна быть в пределах высоты пика гербицида, содержащегося в соответствующем рабочем стандартном растворе.
Если высота пика в пробе исследуемого объекта больше, чем стандартного раствора концентрации 0,1 мкг/см3, то пробу разбавляют.
6.5 Обработка результатов
6.5.1 Уровень остаточного количества гербицида старане X в мг/кг испытуемого продукта вычисляют по формуле
у H-c-V-Vb
где Н — высота пика рабочего стандартного раствора, мм;
Н\ — высота пика исследуемого объекта, мм; с — концентрация стандартного раствора, мкг/см$;
V — объем гексанового экстракта после бутилированля, подготовленный для хроматографирования, см3;
VQ — общий объем экстракта, см3;
\/г — объем экстракта, взятый для очистки, см3; т — масса исследуемого объекта, г.
6.5.2 За окончательный результат измерения принимают среднее арифметическое результатов трех параллельных определений, расхождения между которыми не должны превышать ±10% относительных.
Полнота определения старане составляет, в процентах: 78,0^3,1 — в зерне;
91,0±4,2 — в соломе;
81,0±3,8 — в луке;
100,0±5,2 — в почве.
гост aeo&i—эз
7 ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ РАБОТ
7.1 Технику безопасносТ|И работ прово/*ят по документации, указанной в приложении Б,
ПРИЛОЖЕНИЕ А (справочное)
ОТБОР ПРОБ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕРБИЦИДА СТАРАНЕ
Отбор проб проводят по «Унифицированным пр.авилам отбора проб_ сельско-хозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденным 21.08.79 г. № 2051-79.
ПРИЛОЖЕНИЕ Б (справочное)
ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ РАБОТ
Технику безопасности работ при определении гербицида стараие проводят по «Правилам устройства, техники безопасности,, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиен** при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений сИстемы Минздрава», утвержденным 20.01.81 г. № 425бг—81.
УДК 636.085:006.354
С09
Ключевые слова: гербицид, старане, флуроксипир, зерно, солома, репчатый лук, почва, хроматография, раствор, экстракция
ОКСТУ 2409
Редактор Т.С. Шеко Технический редактор Я С. Гришанова Корректор А. С. Черноусова
Изд. лид. N° 021007 от 10.08,95. Подписано в печать 29.12.98. Уел. печ. л. 0,93. Уч.-изд. л. 0,67. Тираж 100 экз. С1684. Зак. 9.
ИПК Издательство стандартов, 107076, Москва, Колодезный пер., 14. Набрано в Калужской типографии стандартов Отпечатано в ИПК Издательство стандартов
