ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ

СТАНДАРТ

РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

МОЛОКО

Методы определения количества соматических клеток по изменению вязкости

Издание официальное

Москва Стандарти нформ 2011

Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. № 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

1    РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением Всероссийским научно-исследовательским институтом маслоделия и сыроделия Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИМС Россельхозакадемии)

2    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК470 «Молоко и продукты переработки молока»

3    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 ноября 2010 г. № 731-ст

4    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ, 2011

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

ГОСТ Р 54077-2010

Содержание

1    Область применения……………………………………..1

2    Нормативные ссылки……………………………………..1

3    Термины и определения……………………………………1

4    Отбор проб………………………………………….1

5    Визуальный метод определения количества соматических клеток в сыром молоке по изменению

вязкости……………………………………………2

6    Метод определения количества соматических клеток в сыром молоке с применением вискозиметра …………………………………………….3

Библиография………………………………………….5

ГОСТ Р 54077-2010

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОЛОКО

Методы определения количества соматических клеток по изменению вязкости

Milk. Methods for determination of somatic cells quantity by estimation of viscosity change

Дата введения — 2012—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на сырое молоко и устанавливает методы определения количества соматических клеток по изменению вязкости визуальным способом и с применением вискозиметра.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 1770—74 (ИСО 1042—83, ИСО 4788—80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 13928-84 Молоко и сливки заготовляемые. Правила приемки, методы отбора проб и подготовка их к анализу

ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 23455-79 Препарат «Мастоприм». Технические условия

ГОСТ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 28498—90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 29169-91 (ИСО 648—77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3    Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины, установленные [1].

4    Отбор проб

4.1 Отбор проб сырого молока и подготовка их к испытанию — по ГОСТ 13928.

Издание официальное

5 Визуальный метод определения количества соматических клеток в сыром молоке по изменению вязкости

5.1    Сущность метода

Метод основан на воздействии сульфанола (поверхностно-активного вещества, входящего в состав препарата «Мастоприм») на клеточную оболочку соматических клеток, приводящем к нарушению ее целостности и выходу содержимого клеток во внешнюю среду. При этом изменяется вязкость (консистенция) сырого молока, что оценивают визуально.

5.2    Средства измерений, вспомогательное оборудование и материалы

Весы лабораторные среднего класса точности, с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания + 0,1 г.

Колбы мерные 1(2, 3, 4)—100—2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 2(3)—1—1 по ГОСТ 29169.

Пластинки молочно-контрольные ПМК-1.

Термометр стеклянный жидкостный (нертутный) по ГОСТ 28498, диапазоном измерения от 0 °С до 100 °С , ценой деления шкалы 1 °С.

Стаканы 1(2)—50 по ГОСТ 25336.

Палочки стеклянные или пластмассовые с оплавленным концом диаметром не более 5 мм.

Плитка электрическая по ГОСТ 14919.

Препарат «Мастоприм» по ГОСТ 23455.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Вода питьевая по [2].

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству не ниже вышеуказанных.

5.3    Подготовка к анализу

5.3.1    Приготовление кипяченой питьевой воды

Питьевую воду кипятят в течение 5—10 мин, охлаждают до температуры 30 °С — 35 °С и используют для приготовления раствора препарата «Мастоприм».

5.3.2    Приготовление раствора препарата «Мастоприм»

2,5 г препарата вносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доливают до метки дистиллированной или кипяченой питьевой водой температурой 30 °С — 35 °С. Раствор перед применением перемешивают.

Срок хранения раствора — 1 сут при температуре хранения 10 °С — 30 °С.

5.4    Проведение анализа

От тщательно перемешенной пробы анализируемого сырого молока пипеткой отбирают 1 см³, помещают в луночку пластинки ПМК-1 и добавляют 1 см³ раствора препарата «Мастоприм».

Сырое молоко с раствором препарата «Мастоприм» интенсивно перемешивают стеклянной или пластмассовой палочкой в течение 10 с. Не прекращая интенсивного перемешивания смеси в луночке, поднимают палочку вверх на 5—7 см и визуально оценивают изменение вязкости смеси.

Наблюдение ведут не более 60 с.

5.5    Обработка результатов

Количество соматических клеток в анализируемом сыром молоке устанавливают визуально по изменению вязкости (консистенции) смеси сырого молока с препаратом «Мастоприм» в соответствии с требованиями таблицы 1.

Таблица 1

Характеристика вязкости (консистенции) смеси Ориентировочное количество соматических клеток в 1 см3 сырого молока Однородная жидкость или слабый сгусток, который слегка тянется за палочкой Не более 500 тыс.* От сгустка, тянущегося за палочкой в виде нити, до выраженного сгустка, при перемешивании которого хорошо видна выемка на дне луночки пластинки. Сгусток не выбрасывается палочкой из луночки пластинки От 500 тыс. до 1 млн

Окончание таблицы 1

Характеристика вязкости (консистенции) смеси Ориентировочное количество соматических клеток в 1 см3 сырого молока Плотный сгусток, который выбрасывается палочкой из луночки пластинки Св. 1 млн * Нижний предел точности визуального метода — 500 тыс. соматических клеток в 1 см3 сырого молока, поэтому для определения в сыром молоке меньшего количества соматических клеток (высший сорт сырого молока в соответствии с [1]) необходимо применять инструментальный метод с использованием вискозиметра.

6 Метод определения количества соматических клеток в сыром молоке с применением вискозиметра

6.1    Сущность метода

Метод основан на воздействии сульфанола (поверхностно-активного вещества, входящего в состав препарата «Мастоприм») на клеточную оболочку соматических клеток, приводящем к нарушению ее целостности и выходу содержимого клеток во внешнюю среду. При этом изменяется вязкость (консистенция), что оценивают вискозиметром.

6.2    Средства измерений, вспомогательное оборудование и материалы

Весы лабораторные среднего класса точности, с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания + 0,1 г.

Вискозиметр капиллярного типа, откалиброванный производителем прибора на определение количества соматических клеток в сыром молоке.

Колбы мерные 1(2, 3, 4)—100—2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 2(3)—1—5(10) по ГОСТ 29169.

Термометр стеклянный жидкостный (нертутный) по ГОСТ 28498, диапазоном измерения отО °С до 100 °С , ценой деления шкалы 1 °С.

Секундомер электронный, тип СТЦ-2.

Стаканы 1(2)—50 по ГОСТ 25336.

Палочки стеклянные или пластмассовые с оплавленным концом диаметром не более 5 мм.

Плитка электрическая по ГОСТ 14919.

Препарат «Мастоприм» по ГОСТ 23455.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Вода питьевая по [2].

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству не ниже вышеуказанных.

6.3    Подготовка к анализу

6.3.1    Приготовление кипяченой питьевой воды

Питьевую воду кипятят в течение 5—10 мин, охлаждают до температуры 30 °С — 35 °С и используют для приготовления раствора препарата «Мастоприм».

6.3.2    Приготовление раствора препарата «Мастоприм»

3,5 г препарата вносят в мерную колбу вместимостью 100 см¹ и доливают до метки дистиллированной или кипяченой питьевой водой при температуре 30 °С — 35 °С. Раствор перед применением перемешивают.

Срок хранения раствора — 1 сут при температуре хранения 10 °С — 30 °С.

6.3.3    Подготовка пробы сырого молока для анализа

Перед проведением анализа устанавливают температуру сырого молока в пределах от 18 °С до 22 °С.

6.4 Проведение анализа

5 см¹ раствора препарата «Мастоприм» и 10 см¹ анализируемого сырого молока отбирают пипетками и вносят в сосуд вискозиметра. Анализируемое сырое молоко перед отбором пробы необходимо тщательно перемешать и при необходимости очистить от механических примесей.

Смесь анализируемого сырого молока с раствором препарата «Мастоприм» в сосуде вискозиметра перемешивают в течение (30 +10) с в ручном или автоматическом режиме. По окончании перемешивания определяют количество соматических клеток в анализируемом сыром молоке по времени вытекания смеси из капилляра. Продолжительность вытекания определяется вязкостью смеси сырого молока с раствором препарата «Мастоприм», которая коррелирует с исходным содержанием в нем соматических клеток.

Диапазон определения количества соматических клеток при использовании капиллярных вискозиметров составляет от 90 до 1500 тыс. в 1 см³ сырого молока и продолжительность вытекания смеси из капилляра колеблется от 12 до 58 с, что указано в таблице 2.

Таблица 2

Продолжительность вытекания*, с Количество соматических клеток, тыс./см3 От 12,0 до 15,0 От 90 до 200 » 15,0 » 18,0 » 200 » 300 » 18,0 » 21,5 » 300 » 400 » 21,5 » 25,0 » 400 » 500 » 25,0 » 27,5 » 500 » 600 » 27,5 » 30,0 » 600 » 700 » 30,0 » 32,0 » 700 » 800 » 32,0 » 34,5 » 800 » 900 » 34,5 » 37,0 » 900 »1000 » 37,0 » 40,5 »1000 »1100 » 40,5 » 44,0 »1100 »1200 » 44,0 » 48,5 »1200 »1300 » 48,5 » 53,0 »1300 »1400 » 53,0 » 58,0 »1400 »1500 * Продолжительность вытекания смеси из капилляра вискозиметра диаметром (1,50 ± 0,05) мм.

После проведения анализа смеси для каждой исследуемой пробы сырого молока сосуд прибора следует подготовить для проведения следующего анализа согласно процедуре, описанной в инструкции по применению прибора.

6.5 Обработка результатов

За окончательный результат анализа принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми не должно превышать:

–    1 с для времени вытекания смеси от 12,0 до 18,0 с;

–    2с »    »    »    »    от    18,1    до    25,0    с;

–    Зс    »    »    »    »    от 25,1    до    31,0    с;

–    4 с    »    »    »    »    от 31,1    до    37,0    с;

–    5 с    »    »    »    »    от 37,1    до    46,0    с;

–    6 с    »    »    »    »    от 46,1    до    58,0    с.

Предел допускаемой погрешности результатов измерений составляет 10 % в интервале доверительной вероятности Р = 0,95. ²

ГОСТ Р 54077-2010

Библиография

[1]    Федеральный закон от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию» (с изменением)

[2]    СанПиН 2.1.4.1074—01 Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем

питьевого водоснабжения. Контроль качества ³

УДК 576.8:006.354    ОКС    67.100.10    Н19    ОКСТУ    9209

Ключевые слова: сырое молоко, методы микробиологического анализа, соматические клетки, клеточная оболочка, визуальная оценка, вискозиметр ⁴

Редактор Л. В. Коретникова Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор И.А. Королева Компьютерная верстка В.И. Гоищенко

Сдано в набор 13.09.2011. Подписано в печать 16.09.2011. Формат бОхвД¹/^ Гарнитура Ариал. Уел. печ. л. 1,40.

Уч.-изд. л. 0,60. Тираж 191 экз. Зак. 857.

1

2

3

4

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ», 123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru info@gostinfo.ru Набрано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» на ПЭВМ.

Отпечатано в филиале ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» — тип. «Московский печатник», 117418 Москва, Нахимовский проспект, 31, к. 2.